Major League Baseball (MLB) er det bedste og mest prestigefyldte niveau inden for baseball. Det er fællesbetegnelsen for de to professionelle amerikanske (og til dels canadiske) ligaer American League og National League.
Major League Baseball ledes af en kommissær, og organisationen står for alt lige fra ansættelse af dommere til marketing. Desuden kan kommissæren pålægge klubberne eller spillerne bøder og andre straffe.
Der foregår ingen op- eller nedrykning fra MLB, og ligaernes struktur ligger således fast. Imidlertid kan ligaerne udvides med nye hold, hvilket dog kun sker med årtiers mellemrum. Ligeledes kan et hold bede om at blive fjernet fra MLB, hvis der opstår finansielle problemer eller lignende. Dette er dog også en møjsommelig proces. Endvidere er det hændt, at et hold er blevet flyttet fra en division til en anden – eller sågar fra en liga til en anden.